Efecto de la congelación en la viabilidad de espermatozoides epididimarios de Cavia porcellus "cuy"
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Date
2009
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Publisher
Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga
Abstract
El presente trabajo tuvo por objetivos colectar espermatozoides epididimarios de cuy mediante el lavado retrógrado, evaluar la viabilidad espermática pre-congelamiento y post-descongelamiento de los espermatozoides epididimarios de cuy en base a la motilidad individual, integridad de membrana y reacción del acrosoma. Se emplearon 104 pares de testículos procedentes de cuyes beneficiados para consumo humano en el Mercado de Caquetá - San Martín de Porres, se transportaron al Laboratorio de Biotecnología y Fisiología Animal - Universidad Ricardo Palma a temperatura ambiente. El lavado de las caudas se realizó mediante flujo retrógrado con el diluyente a base de Tris, obteniéndose una concentración que osciló entre 10 x 10? 30 x 10 esp/ml y una vitalidad espermática promedio de 71.29%. Para evaluar el efecto de la congelación de los espermatozoides epididimarios se utilizó diferentes agentes crioprotectores: glicerol al 2% añadido en un paso, dos pasos y 30 minutos, etilenglicol a concentraciones de 5, 10 y 15% y Dimetilsulfóxido (DMSO) a concentraciones de 5, 10 y 15% y la combinación de etilenglicol a concentraciones de 5, 10 y 15% + 2% de glicerol a cada una, DMSO a concentraciones de 5, 10 y 15 % + 2% glicerol a cada una, los que se añadieron al medio base en el que se encontraban los espermatozoides, permanecieron entre 2 - 3 horas a 5 °C, para el proceso de estabilización, se aspiró manualmente en pajillas de 0.25 cc, se expuso a vapores de nitrógeno líquido por 10 minutos para luego sumergirlos por completo. De acuerdo a los resultados obtenidos se observó que la motilidad pre-congelación osciló entre 54.17 - 68.33% y post-descongelación de 3% siendo la más alta obtenida mediante el uso de glicerol, integridad de membrana pre-congelación medida por la prueba de Shock hipo-osmótico (HOST) osciló entre 46.67 -70.17% y evaluada mediante la Prueba del Agua (WT) osciló entre 47.50 - 69.50% y postcongelación por la prueba de HOST 9.83% cuando se usó glicerol como crioprotector y por la prueba de WT 9.27% cuando se usó DMSO + 2% glicerol y reacción del acrosoma inducida por la adición de imidazol al medio SM precongelación que fue 62.30 +/- 8.96% y no se observó reacción del acrosoma postdescongelación. Según los resultados obtenidos, se concluye que la congelación en nitrógeno liquido (a -196°C) afecta drásticamente la viabilidad de los espermatozoides epididimarios de cuy.
Description
Keywords
Espermatozoides, Viabilidad, Congelación, Crioprotectores, Cavia porcellus, Biotecnología animal
