Evaluación de dos protocoloes para la producción in vitro de embriones "bovinos" Bos taurus en la región de Ayacucho, 2012-2013

Abstract

En el estudio se planteó como objetivos determinar el porcentaje de ovocitos madurados, el porcentaje de división embrionaria a las 48 horas post inseminación y el porcentaje de embriones producidos a los siete días de cultivo con medio KSOMaa para el primer protocolo y SOFaa para el segundo protocolo, además de clasificar los embriones según las normas de la Sociedad Internacional de Transferencia de Embriones. La producción in vitre de embriones bovinos fue llevado a cabo en el Laboratorio de Biotecnología Reproductiva de la Estación Experimental Agraria Canaán-Ayacucho. Se trabajó con una muestra de 1699 ovocitos extraídos por aspiración folicular, utilizados para conformar los dos grupos de estudio. Los ovocitos seleccionados, con tres a más capas de células del cúmulus y citoplasma homogéneo, fueron madurados in vitre por 24 horas para luego ser fertilizados in vitre por 18 horas previo tratamiento espermático con Swim up y finalmente cultivados en dos diferentes medios de cultivo por siete días, el primero medio optimizado simple de potasio (KSOMaa) y el segundo medio fluido oviductual sintético (SOFaa) a 38,5°C, 5% de C02 en aire y un 95% de humedad relativa. Como resultado de la investigación se obtuvo un 94,46%: de ovocitos madurados y un 37,39% de división embrionaria a las 48 horas post inseminación para el primer protocolo y un 96,39% de madurados y 39,19%, de división embrionaria a las 48 horas post inseminación para el segundo protocolo, no existiendo diferencia significativa entre ambos (p>0.05). El porcentaje de embriones a los siete días de cultivo fue mejor para el segundo protocolo con SOFaa de 19,63%, con respecto al primer protocolo con medio KSOMaa de 13,06% existiendo diferencia significativa (p<0.05).Finalmente los embriones fueron clasificados en cuatro categorías según la IETS. Para KSOMaa se halló 0% de embriones de excelente calidad, 6,32% de regular calidad y 6,84% de mala calidad y con respecto a SOFaa se halló 3,03% de embriones de excelente calidad, 8,69% de regular calidad y de 6,62% de mala calidad, las tres primeras categorías según la IETS lo constituyen los embriones transferibles. La cuarta categoría o intransferible fue de 86,84% para KSOMaa y un 81,66% para SOFaa. En conclusión el desarrollo de los embriones hasta blastocistos en medio SOFaa es mejor respecto al medio KSOMaa, sin embargo la calidad se encuentra influenciada por la competencia para el desarrollo y las condiciones subóptimas de cultivo, ambas se combina para producir un retraso en los embriones, anormalidades en el desarrollo y una reducción de la viabilidad.