Mujica Lengua, Fidel RodolfoContreras Huamaní, MijailGuillén Palomino, Crissthel YverlinPrado Yupanqui, Jhon Wacnerson2026-05-272026-05-272025TESIS B1144_Prahttps://hdl.handle.net/20.500.14612/8791Los fibroblastos son esenciales para la reparación tisular y los modelos in vitro de medicina regenerativa. Sin embargo, los protocolos optimizados para su aislamiento y expansión en Camélidos Sudamericanos (CSA) siguen siendo limitados. El objetivo fue evaluar el efecto de la digestión enzimática y los medios de cultivo sobre la viabilidad, el rendimiento y la proliferación de fibroblastos obtenidos de biopsias de oreja de alpaca. Las biopsias se procesaron utilizando colagenasa (3 mg/mL) sola o en combinación con hialuronidasa (1 mg/mL), seguido de cultivo en TCM-199 y DMEM. La viabilidad celular se evaluó mediante tinción con azul tripán y Hoechst/PI, mientras que la proliferación y el tiempo de duplicación se determinaron en condiciones de cultivo estándar. Los resultados mostraron que la combinación de colagenasa e hialuronidasa no mejoró el número de células aisladas y se asoció con un aumento de la apoptosis en comparación con la colagenasa sola. El medio de cultivo tuvo una mayor influencia que el tratamiento enzimático: los fibroblastos expandidos en DMEM mostraron tasas de proliferación significativamente mayores (p < 0,001) y tiempos de duplicación más cortos en comparación con los del TCM-199. Estos hallazgos indican que la digestión con colagenasa a 3 mg/mL es suficiente para el aislamiento eficaz de fibroblastos del tejido de la oreja de alpaca, mientras que el DMEM proporciona condiciones superiores para la expansión celular. Este trabajo establece las bases metodológicas para el cultivo de fibroblastos en alpaca, con posibles aplicaciones en medicina regenerativa veterinaria y biotecnología.application/pdfspahttps://purl.org/coar/access_right/c_abf2FibroblastosDigestión enzimáticaViabilidadRendimientoProliferaciónBiotecnología animalVicugna pacoshttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttps://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.03