Estandarización de Reacción en Cadena de la Polimerasa en Tiempo Real para la detección de Echinococcus spp. en ganado vacuno Bos taurus. Ayacucho, 2024

Abstract

La equinococosis quística constituye una zoonosis de importancia en salud pública y sanidad animal en la región Ayacucho, donde la crianza extensiva de ganado, la convivencia estrecha entre perros y animales de producción, y las limitaciones en el diagnóstico oportuno favorecen la persistencia de la enfermedad y dificultan su vigilancia epidemiológica. El presente trabajo tuvo como objetivo estandarizar la técnica de la Reacción de la Cadena de la Polimerasa en tiempo real (qPCR) para la detección de Echinococcus spp. en quistes hidatídicos obtenidos de pulmones de ganado vacuno (Bos taurus) de la región Ayacucho. Para ello, se realizó la obtención y purificación de ADN parasitario, la optimización de las condiciones de amplificación y la evaluación del desempeño de la técnica mediante curvas estándar. La investigación fue de tipo básico, con enfoque cuantitativo y diseño experimental. Se analizaron 22 muestras de quistes hidatídicos recolectados de bovinos beneficiados en el matadero del distrito de Carmen Alto. El ADN fue extraído a partir de protoescólices utilizando un kit comercial, evaluándose su concentración y pureza mediante espectrofotometría UV. Posteriormente, se realizó la estandarización de la qPCR utilizando cebadores específicos, aplicando diluciones seriadas del ADN para la construcción de curvas estándar y la determinación de la eficiencia de amplificación. Los resultados evidenciaron una amplia variabilidad en la concentración y pureza del ADN, las curvas de amplificación mostraron un comportamiento sigmoide característico, con una clara relación inversa entre los valores de Ct y la concentración de ADN. La curva estándar presentó una alta linealidad (R² = 0,99872), una pendiente de -3,574 y una eficiencia de amplificación del 90%, indicando una adecuada precisión y reproducibilidad del método. Se concluye que la técnica de qPCR estandarizada constituye una herramienta altamente sensible, específica y confiable para la detección de Echinococcus spp. en ganado vacuno. Su implementación en el contexto local representa un aporte significativo para el fortalecimiento del diagnóstico molecular y la vigilancia epidemiológica de la equinococosis en la región Ayacucho.