Efecto de la digestión enzimática y medios de cultivo en la viabilidad, rendimiento y proliferación de fibroblastos obtenidos por biopsia de oreja de Vicugna pacos “alpaca”
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Date
2025
Authors
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Publisher
Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga
Abstract
Los fibroblastos son esenciales para la reparación tisular y los modelos in vitro de medicina regenerativa. Sin embargo, los protocolos optimizados para su aislamiento y expansión en Camélidos Sudamericanos (CSA) siguen siendo limitados. El objetivo fue evaluar el efecto de la digestión enzimática y los medios de cultivo sobre la viabilidad, el rendimiento y la proliferación de fibroblastos obtenidos de biopsias de oreja de alpaca. Las biopsias se procesaron utilizando colagenasa (3 mg/mL) sola o en combinación con hialuronidasa (1 mg/mL), seguido de cultivo en TCM-199 y DMEM. La viabilidad celular se evaluó mediante tinción con azul tripán y Hoechst/PI, mientras que la proliferación y el tiempo de duplicación se determinaron en condiciones de cultivo estándar. Los resultados mostraron que la combinación de colagenasa e hialuronidasa no mejoró el número de células aisladas y se asoció con un aumento de la apoptosis en comparación con la colagenasa sola. El medio de cultivo tuvo una mayor influencia que el tratamiento enzimático: los fibroblastos expandidos en DMEM mostraron tasas de proliferación significativamente mayores (p < 0,001) y tiempos de duplicación más cortos en comparación con los del TCM-199. Estos hallazgos indican que la digestión con colagenasa a 3 mg/mL es suficiente para el aislamiento eficaz de fibroblastos del tejido de la oreja de alpaca, mientras que el DMEM proporciona condiciones superiores para la expansión celular. Este trabajo establece las bases metodológicas para el cultivo de fibroblastos en alpaca, con posibles aplicaciones en medicina regenerativa veterinaria y biotecnología.
Description
Keywords
Fibroblastos, Digestión enzimática, Viabilidad, Rendimiento, Proliferación, Biotecnología animal, Vicugna pacos
